TSH - ELISA

Le dosage immunoenzymatique quantitatif de la TSH est basé sur la technique ELISA (Enzyme- linked Immunosorbent Assay).

Le système de dosage utilise deux anticorps monoclonaux spécifiques de différents déterminants antigéniques de la sous-unité bêta de la TSH. Le premier anticorps est immobilisé à la surface des puits de microtitration. Le second anticorps est conjugué à la peroxydase de raifort.L'échantillon à tester est autorisé à réagir simultanément avec les deux anticorps, ce qui fait que les molécules de TSH sont prises en sandwich entre la phase solide et les anticorps liés à l'enzyme.

. Après une étape d'incubation, les puits sont lavés avec la solution de lavage pour éliminer tout le matériel non lié. Le complexe immunitaire est visualisé en ajoutant le substrat de tétraméthylbenzidine (TMB) qui donne un produit de réaction bleu. L'intensité de ce produit est proportionnelle à la concentration de TSH dans l'échantillon. De l'acide sulfurique est ajouté pour arrêter la réaction. Cela produit une couleur de point final jaune.

L'absorbance à 450 nm est lue à l'aide d'un lecteur de microplaques ELISA. L'intensité de la couleur est directement proportionnelle à la concentration de TSH présente dans l'échantillon à tester.

Espèces apparentées : TSH