Les microplaques sont recouvertes de HSV-1 et HSV-2 natifs inactivés.
La phase solide est d'abord traitée avec l'échantillon dilué et les IgG anti-HSV sont capturées, si elles sont présentes, par les antigènes.
Après élimination par lavage de tous les autres composants de l'échantillon, lors de la deuxième incubation, les IgG anti-HSV liées sont détectées par l'ajout d'anticorps polyclonaux spécifiques anti-IgG, marqués à la peroxydase (HRP).
L'enzyme capturée sur la phase solide, agissant sur le mélange substrat/chromogène, génère un signal optique proportionnel à la quantité d'anticorps IgG anti-HSV présents dans l'échantillon. Une courbe d'étalonnage, établie par rapport à un étalon de référence interne, permet une détermination quantitative des anticorps IgG chez le patient.