La coloration de Gram est une méthode de différenciation des espèces bactériennes, largement connue et utilisée en microbiologie. Elle constitue également l'une des méthodes diagnostiques les plus fréquemment employées dans les laboratoires hospitaliers et cliniques.
Cette méthode permet de répartir les bactéries en deux groupes distincts : Gram-positives et Gram-négatives. Cette classification repose sur les différences structurelles de la membrane bactérienne des deux groupes, et plus précisément sur leur capacité à retenir le colorant. Les bactéries Gram-positives possèdent une membrane cellulaire plus épaisse, qui permet de retenir le colorant à l'intérieur de la cellule grâce au traitement à la solution de Lugol, laquelle forme un complexe insoluble entre l'iode et le colorant primaire. Les bactéries Gram-négatives, quant à elles, présentent une structure membranaire plus fine, incapable de retenir le colorant : celui-ci est alors évacué à travers la membrane, et l'utilisation d'une contre-coloration permet de finaliser la différenciation entre les deux groupes bactériens.