T4 libre - ELISA

La détermination immunoenzymatique quantitative de la T4 libre est basée sur la technique ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay) compétitive.

Les microplaques sont recouvertes d'anticorps anti-T4 spécifiques. La T4 libre présente dans l'échantillon entre en compétition avec la T4 conjuguée à la peroxydase de raifort (HRP) ajoutée pour la liaison des anticorps. Ensuite, les puits sont lavés pour éliminer tout le matériel non lié. Les complexes immuns sont visualisés en ajoutant le substrat de tétraméthylbenzidine (TMB) qui donne un produit de réaction bleu. L'intensité de ce produit est inversement proportionnelle à la quantité de T4 libre dans l'échantillon. De l'acide sulfurique est ajouté pour arrêter la réaction. Cela donne une couleur jaune au point final. L'absorbance à 450/620 nm est lue à l'aide d'un lecteur de plaques à micropuits ELISA.

Espèces apparentées : T4 libre