Les microplaques sont recouvertes d’une préparation de centromère B recombinant. Lors de la première incubation, la phase solide est traitée avec des échantillons dilués et les IgG anti-CENPB, si elles sont présentes, sont capturées par la phase solide. Après lavage, tous les autres composants de l’échantillon, lors de la deuxième incubation, les anticorps anti-CENPB liés sont détectés par l’ajout d’anticorps anti-hIgG. marqué avec la peroxydase (HRP).
L’enzyme capturée sur la phase solide, agissant sur le mélange substrat/chromogène, génère un signal optique proportionnel à la quantité d’anticorps IgG anti-CENPB présents dans l’échantillon. IgG dans l’échantillon peut être quantifié au moyen d’une courbe standard étalonnée en unités arbitraires par millilitre (arbU/ml) car aucune norme internationale n’est disponible.