Les microplaques sont recouvertes d'antigènes recombinants spécifiques du VHE codant pour les déterminants conservateurs et immunodominants des 4 sous-types.
La phase solide est d'abord traitée avec l'échantillon dilué et les IgM anti-VHE sont capturées, si elles sont présentes, par les antigènes.
Après élimination par lavage de tous les autres composants de l'échantillon, lors de la deuxième incubation, les IgM anti-VHE liées sont détectées par l'ajout d'anticorps polyclonaux spécifiques anti-IgM, marqués à la peroxydase (HRP).
L'enzyme capturée sur la phase solide, agissant sur le mélange substrat/chromogène, génère un signal optique proportionnel à la quantité d'IgM anti-VHE présente dans l'échantillon. Une valeur seuil permet d'interpréter les densités optiques en résultats négatifs et positifs pour les IgM anti-HEV.