Après lavage, les anticorps capturés sont détectés par un HBsAg, marqué avec la peroxydase (HRP), qui se lie spécifiquement au deuxième site de liaison disponible de ces anticorps.
L’enzyme liée spécifiquement aux puits, en agissant sur le mélange substrat/chromogène, génère un signal optique qui est proportionnel à la quantité de HBsAb dans l’échantillon et peut être détecté par un lecteur ELISA.
La quantité d’anticorps peut être quantifiée au moyen d’une courbe standard étalonnée par rapport à la préparation de référence W.H.O.
Les échantillons sont prétraités dans le puits avec un diluant capable de bloquer l’interférence présente chez les individus vaccinés.