Le test est basé sur le principe de la « capture des IgM », où les anticorps de classe IgM dans l’échantillon sont d’abord capturés par la phase solide enrobée d’anticorps anti-hIgM.
Après lavage de tous les autres composants de l’échantillon et en particulier des anticorps IgG, les IgM spécifiques capturés sur la phase solide sont détectés par l’ajout d’une préparation purifiée de HAV inactivé, marqué avec un anticorps conjugué à la peroxydase (HRP).
Après incubation, les micropuits sont lavés pour éliminer le conjugué non lié, puis le chromogène/substrat est ajouté.
En présence de peroxydase, le substrat incolore est hydrolysé en un produit final coloré dont la densité optique peut être détectée et qui est proportionnelle à la quantité d’anticorps anti-VHA présents dans l’échantillon.